亚洲综合无码精品一区二区三区,精品日本一区二区三区在线观看,青草国产精品久久久久久,久久久久久精品成人鲁丝电影

免費咨詢熱線:
技術文章
首頁 > 技術中心 > Serochem PEI轉染試劑在CHO懸浮細胞上的轉染步驟

Serochem PEI轉染試劑在CHO懸浮細胞上的轉染步驟

 更新時間:2024-04-08 點擊量:1198

Serochem PEI轉染試劑在CHO懸浮細胞上的轉染步驟如下:

一、轉染前

傳代和擴增細胞以獲得具有大于95%的活力和介于(1.5至2.0)x 106之間的活細胞密度的培養(yǎng)物.

二、轉染

1.在轉染前,確保生存能力大于95%,活細胞密度為(1.5至2.0)x 10 6細胞/mL。

2.將活細胞密度稀釋至1.05 x 10 6每毫升細胞數(shù)。

3.轉化pDNA和PEI引物™ 1 mg/mL試劑容器多次以充分混合。

4.將每mL培養(yǎng)物轉移1μg pDNA至一個干凈的小瓶中轉染。用新鮮培養(yǎng)基(5%最終培養(yǎng)體積)稀釋至20μg/mL。

5.將5μL PEI Prime轉移到一個干凈的小瓶中™ 每毫升1毫克/毫待轉染的培養(yǎng)物。使用培養(yǎng)基稀釋至75μg/mL(5%最終培養(yǎng)物

體積)。

6.將稀釋的pDNA和PEI Prime™混合在一起. 反轉幾次,然后允許在室溫下加蓋休息10分鐘。輕輕翻轉,使用前立即關閉容器

一次。

7.使用10mL pDNA/PEI混合物用于每90mL待培養(yǎng)的培養(yǎng)物轉染。一邊攪拌一邊逐漸將混合物加入培養(yǎng)基中。

8.按照典型條件培養(yǎng)細胞。

三、轉染后

如果使用飼料、加強劑、補充劑或增強劑,在轉染后6小時可以添加。

根據(jù)細胞培養(yǎng)基的不同,可能需要添加鈉丁酸鹽添加到培養(yǎng)基中以獲得CHO懸浮液中的基因表達。如有必要,確定,制備5個

轉染后的亞培養(yǎng)物,并添加丁酸鈉至0、2.5、5、7.5或10mM的最終濃度基于最終產(chǎn)率的適當濃度。如果使用GFP對照,轉染效率應超過70%。48小時后觀察。對于優(yōu)化的程序,超過80%的效率是合理的。監(jiān)測表達水平并在

察到穩(wěn)定滴度后收獲。對于典型的過程,在轉染后5至7天分泌的蛋白質將最高。其他工藝,如使用低溫和/或使用批進料以獲得

最大產(chǎn)量,將改變峰值收獲窗口。

更多有關Serochem PEI轉染試劑在CHO懸浮細胞上的轉染步驟,請聯(lián)系SeroChem代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司客服!

image.png










河南妇女毛浓浓bw| 久久久久无码精品国产AV蜜桃 | 久久久久人妻一区二区三区VR| 国产成人无码精品久久久APP| 久久婷婷五月综合97色直播 | av网站大全| 天天躁日日躁狠狠躁AV| 高清欧美videossexo| 国精产品一二伊田园9777| 自拍偷自拍亚洲精品被多人伦好爽| 777久久人妻少妇嫩草av | 国产免费观看黄a片又黄又硬小说| 高h猛烈失禁潮喷a片在线观看| 大乳BOOBS巨大吃乳| 亚洲AV无码乱码在线观看裸奔 | 侵犯人妻教师波多野吉衣| 成人精品一区二区三区中文字幕| 婷婷五月色丁香综缴情| 天天摸日日添狠狠添婷婷| 亚洲成A人片在线观看中文| 天干夜天干天天天爽视频| 国精产品一二三区传媒公司| 欧美激情精品久久久久久| 久久兔费黄a级毛片高清| 动漫内衣办公室| 娇小1213╳YⅩ╳毛片 | 一本一本久久A久久精品综合麻豆| 韩国精品一区二区三区无码视频| 亚洲精品一区中文字幕乱码| 人人妻人人澡人人爽欧美一区双| 久久精品国产亚洲AV蜜臀色欲| 麻豆xxxx乱女少妇精品| A片欧美激情肉欲高潮| 野花香视频在线观看免费| 最近免费最新高清中文字幕韩国| 青青久久久久精品亚洲AV中文| 亚洲国产精品一区二区久久HS| 嗯啊哦快使劲呻吟高潮视频| 装睡被陌生人摸出水好爽| 伸进去摸老妇的毛| 无码熟妇av人妻又粗又大|