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色譜小知識(shí)

 更新時(shí)間:2022-12-05 點(diǎn)擊量:855

色譜法是一種分離方法,是利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)的選擇性分配,以流動(dòng)相對(duì)固定相中的混合物進(jìn)行洗脫,混合物中不同的物質(zhì)會(huì)以不同的速度沿固定相移動(dòng),最終達(dá)到分離的效果。

色譜法根據(jù)物質(zhì)的分離機(jī)制可分為離子交換色譜法、吸附色譜法、分配色譜法、凝膠色譜法、親和色譜法等;根據(jù)流動(dòng)相的不同又可以分為氣相色譜法和液相色譜法。目前常見的色譜法有氣相色譜法、高效液相色譜法(HPLC)、薄層色譜法和柱色譜法等。

柱色譜法是最始的色譜方法,被廣泛應(yīng)用于混合物的分離,包括有機(jī)合成產(chǎn)物、天然提取物以及生物大分子的分離。薄層色譜法因其成本低廉操作簡(jiǎn)單而應(yīng)用廣泛,常被用于對(duì)樣品的粗測(cè)、對(duì)有機(jī)合成反應(yīng)進(jìn)程的檢測(cè)等。氣相色譜法和高效液相色譜法是機(jī)械化程度很高的色譜方法,氣相色譜被廣泛應(yīng)用于小分子量復(fù)雜組分物質(zhì)的定量分析。高效液相色譜法是目前應(yīng)用zui廣泛的色譜方法,幾乎包括定量定性分析的各個(gè)領(lǐng)域。

氣相色譜系統(tǒng)由氣源、色譜柱和柱箱、檢測(cè)器和記錄器等部分組成。氣相色譜的色譜柱比較細(xì)長(zhǎng),根據(jù)結(jié)構(gòu)可以分為填充柱和毛細(xì)管柱,填充柱比較短粗,外殼材質(zhì)一般為不銹鋼,內(nèi)部填充固定相填料;毛細(xì)管柱一般由玻璃或石英成,內(nèi)徑不超過0.5 mm,長(zhǎng)度在數(shù)十米到一百米之間,柱內(nèi)填充填料。

高效液相色譜系統(tǒng)由流動(dòng)相儲(chǔ)液體瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器和記錄器組成。由于液體流動(dòng)相粘度比較高,為了減低柱壓,高效液相色譜的色譜柱一般比較粗,長(zhǎng)度也比氣相色譜柱要短。

氣相和高效液相色譜系統(tǒng)中的色譜柱內(nèi)部可填充填料,純化分離不同的物質(zhì)需要選擇不同的填料/介質(zhì)。

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